RESUMO O difícil processo de propagação em grande escala do dendezeiro (Elaeis guineensis Jacq.) ocorre devido ao seu meristema apical único. Nesse contexto, a micropropagação permite a multiplicação de mudas in vitro e o armazenamento de germoplasma. O objetivo deste estudo foi induzir calosidades embriogênicas de folhas de dendezeiros em baixas concentrações de auxinas e observar a manutenção dessas características durante o cultivo in vitro. Calos foram induzidos em explantes de folhas de 0,5 cm em meio de cultura Y3 suplementado com Picloram (ácido 4-amino-3, 5,6-tricloro-2-piridinocarboxílico) ou 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético), nas concentrações de 0, 1, 3, 6 e 9 mg L-1. O calo com aparência embriogênica foi subcultivado e avaliado quanto à manutenção das características embriogênicas por meio de análises citoquímicas. O melhor tratamento para indução de calosidades foi composto por 1mg. L-1 de Picloram, o que levou à formação de calosidades de 30%. Os calos foram classificados em 4 tipos, com base na cor e na morfologia. As células das calosidades com aspecto nodular e bege apresentaram características embriogênicas, e o potencial embriogênico das massas celulares foi mantido ao longo dos 20 meses de cultivo. Essa adaptação diferenciada ao protocolo pode permitir o avanço na propagação em massa do dendê por cultura de tecidos, indicando a importância da investigação dos temas propostos pela pesquisa.

ABSTRACT Large-scale oil palm propagation (Elaeis guineensis Jacq.) is difficult due to its unique apical meristem. In this context, micropropagation allows the multiplication of seedlings in vitro and the storage of germplasm elites. This study aimed to induce embryogenic calluses from leaves of oil palm plants in low concentrations of auxins and to observe the maintenance of these characteristics during in vitro cultivation. Calluses were induced in 0.5 cm leaf explants in Y3 culture medium supplemented with Picloram (4-Amino-3,5,6-trichloro-2-pyridinecarboxylic acid) or 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid), at concentrations of 0, 1, 3, 6, and 9 mg L-1. The callus with embryogenic appearance was subcultured and evaluated regarding maintenance of embryogenic characteristics by cytochemical analyses. The best treatment for induction of calluses was composed of 1mg.L-1 of Picloram, which led to 30% callus formation. The calluses were classified into4 types, based on color and morphology. The cells of calluses with nodular and beige appearance have embryogenic characteristics, and the embryogenic potential of the cell masses was maintained over the 20 months of cultivation. This differentiated adaptation to the protocol can allow the advance in the mass propagation of oil palm through tissue culture, indicating the importance of investigating the topics proposed by the research.

RESUMO O dendezeiro é economicamente importante pela alta produção de óleo. A embriogênese somática indireta em dendezeiro demanda longo tempo de indução de calos e formação das plantas, sendo importante o estudo do potencial embriogênico dos calos e os mecanismos da embriogênese somática. O objetivo deste estudo foi verificar o efeito de diferentes reguladores de crescimento e espermina na indução de calos embriogênico em explantes de raízes de dendezeiro. Explantes apicais radiculares de aproximadamente 0,5 cm foram isolados de plantas cultivadas in vitro e inoculadas em meio de cultura Y3 com os seguintes tratamentos: meio A - sem reguladores de crescimento; B - 1 mg.L-1 picloram (ácido 4-amino-3,5,6-tricloro-2-piridinacarboxílico); C- 1 mg.L-1 de picloram e 2 mg.L-1 de 2ip (2-isopenteniladenina); D - 2 mg.L-1 de 2ip; E - 1 mg.L-1 de picloram e 2 mg.L-1 de BAP (6-benzilaminopurina); F - 2 mg.L-1 de BAP; e G - 14,5mg.L-1 de espermina. Após, seis meses de cultivo, foram realizadas analises histológicas. Os calos induzidos nos tratamentos com 1 mg.L-1 picloram (B) e 14,5 mg.L-1 espermina (G) apresentaram características embriogênicas, células pequenas, isodiamétricas e formando aglomerados, apesar da grande quantidade de amido. Os calos do melhor tratamento (Y3 com 1 mg.L-1 de picloram) foram inoculados em meio de cultura de Y3 sem adição de reguladores de crescimento para sua regeneração, que após oito meses foram realizadas novas análises histológicas. Todos os tratamentos apresentaram formação de calo, com exceção dos tratamentos D e A. Os calos do tratamento B exibiram células com características embriogênicas, que desenvolveram embriões somáticos.

ABSTRACT Oil palm is economically important as a crop with high oil production. Indirect somatic embryogenesis in oil palm requires a long time for callus induction and plant formation, and it is important to study the embryogenic potential of calli and the mechanisms of somatic embryogenesis. The aim of this study was to test different growth regulators and spermine in induction of embryogenic calli in root explants of oil palm (Elaeis guineensis Jacq). Apex root explants of approximately 0.5 cm were isolated from plants cultivated in vitro and inoculated in Y3 culture medium in the following treatments: A - without growth regulators; B - 1 mg.L-1 picloram (4-amino-3,5,6-trichloro-2-pyridinecarboxylic acid); C - 1 mg.L-1 picloram and 2 mg.L-1 2ip (2-isopentenyladenine); D - 2 mg.L-1 2ip; E - 1 mg.L-1 picloram and 2 mg.L-1 BAP (6-benzylaminopurine); F - 2 mg.L-1 BAP; and G - 14.5 mg.L-1 spermine. After six months of culturing, the calli induced in the treatments were analyzed by light microscopy. The calli induced in the treatments with 1 mg.L-1picloram (B) and treatment with 14.5 mg.L-1spermine (G) exhibited embryogenic characteristics, small and isodiametric cells, forming agglomerates, besides a large amount of starch. Calli of the best treatment (Y3 com 1 mg.L-1 de picloram) were inoculated in Y3 culture medium without addition of growth regulators. After eight months, calli were once more analyzed under light microscopy. All the treatments showed callus formation, except for treatments D and A. Calli of treatment B exhibited cells with embryogenic characteristics that developed somatic embryos.

ABSTRACT The aim of this study was to induce and analyze embryogenic calli from two types of explants (leaves and meristems) of the hybrid Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Leaves and meristems of plants kept in a nursery were disinfected and inoculated in Petri dishes containing MS culture medium supplemented with different concentrations of the growth regulator dicamba (1.13, 4.52, and 9.04 µM) and without it. At 60 days of culturing, the calli were analyzed by scanning electron microscopy and at 90 days were evaluated by light microscopy in regard to the embryogenic characteristics of the cells. Different type of calli were induced in leaf explants, designated as Type I with light yellow coloring, Type II with dark yellow coloring, and Type III of brown coloring; however, only Type I had embryogenic characteristics. In the meristematic explants, only one type of callus was induced, and it had embryogenic characteristics. At 90 days of culturing, the formation of somatic embryos in the different embryogenic stages was observed and the formation of procambium, protoderm, and ground meristem tissues. At 150 days of culturing, the concentration of 1.13 µM of dicamba was prominent in the formation of somatic embryos in the different embryogenic stages.

RESUMO O dendezeiro é uma monocotiledônea, lenhosa e oleaginosa de elevada importância econômica, devido à alta produção de óleo por seus frutos. A germinação das sementes é, atualmente, o método convencional mais utilizado para a propagação do dendezeiro, porém, o sucesso por meio dessa via é limitado pela demora e a baixa porcentagem de germinação. Uma alternativa para a propagação em larga escala do dendezeiro é a técnica biotecnológica de embriogênese somática, mas o enraizamento das plantas germinadas a partir dos embriões somáticos é uma etapa difícil e de grande importância para posterior aclimatização e sucesso na propagação. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito das auxinas ácido indol acético (AIA) e ácido indol-butírico (AIB) no enraizamento de embriões somáticos de dendezeiro híbrido Tenera. Plantas obtidas via embriogênese somática foram inoculadas em meio MS modificado, com 10% de sacarose e 0,6% de ágar e suplementado com AIA ou AIB, nas concentrações 5 µM, 10 µM, 15 µM e na ausência de regulador de crescimento. Depois de 120 dias foram analisados os parâmetros presença de raiz, tipo de raiz, comprimento da maior raiz, número de folhas e comprimento da parte aérea. A presença de reguladores de crescimento foi favorável ao enraizamento, tendo as plantas cultivadas com o regulador de crescimento AIB na concentração de 15 µM apresentado maior porcentagem de enraizamento (87%) e melhores resultados para os parâmetros número de raízes (1,33) e comprimento da parte aérea (9,83).

ABSTRACT Oil palm is a woody monocot of economic importance due to high oil production from its fruits. Currently, the conventional method most used to propagate oil palm is seed germination, but success is limited by long time requirements and low germination percentage. An alternative for large-scale propagation of oil palm is the biotechnological technique of somatic embryogenesis. The rooting of plants germinated from somatic embryos is a difficult step, yet it is of great importance for later acclimatization and success in propagation. The aim of this study was to evaluate the effect of the auxins indole acetic acid (IAA) and indole butyric acid (IBA) on the rooting of somatic embryos of Tenera hybrid oil palm. Plants obtained by somatic embryogenesis were inoculated in modified MS medium with 10% sucrose and 0.6% agar and supplemented with IAA or IBA at concentrations of 5 µM, 10 µM, and 15 µM, and the absence of growth regulators. After 120 days, the presence of roots, root type, length of the longest root, number of roots, number of leaves, and shoot length were analyzed. Growth regulators were favorable to rooting; plants cultivated with IBA growth regulator at 15 µM showed higher rooting percentage (87%) and better results for the parameters of number of roots (1.33) and shoot length (9.83).

RESUMO A micropropagação em sistemas de biorreatores é considerada como uma forma de reduzir os custos de produção por meio do escalonamento de automatização do processo. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um protocolo eficiente de produção de mudas de Eucalyptus camaldulensis em diferentes tipos de sistema, incluindo biorreator de imersão continua e temporária. Para isso, meristemas apicais (1 mm) e meristemas apicais com tecido adjacente (2,5 mm) foram usados como explantes iniciais. Esses tecidos foram cultivados, por 60 dias, em meio de cultura suplementado com 1 mg L-1 de ácido indolacético (AIA) e 0.32 mg L-1 de benzilaminopurina (BAP). Após 60 dias, os meristemas com tecidos adjacentes foram transferidos para biorreatores de imersão contínua ou temporária e mantidos no escuro ou sob condições controladas de luminosidade. Para verificar o efeito da fonte de explante na multiplicação em biorreator foram testados explantes subcultivados de meristemas multiplicados em meio de cultura semissólido e meristemas multiplicados em biorreator de imersão contínua e mantidos no escuro. Despois de estabelecer esses parâmetros, os experimentos de multiplicação foram realizados em biorreatores de imersão contínua e temporária. Os explantes multiplicados foram enraizados em meio de cultura MS suplementado com 0, 2, 4, 8 e 20 mg L-1 de ácido indolbutírico (AIB) e mantidos no escuro ou sob condições controladas de luminosidade. Depois do enraizamento as plantas foram aclimatizadas em câmara de nebulização. Os meristemas com tecidos adjacentes favoreceram um maior número de gemas/explantes. O biorreator de imersão contínua e mantido no escuro promoveu maior número de brotações e maior taxa de multiplicação e o melhor enraizamento ocorreram no meio de cultura isento de auxina, mantido no escuro por 15 dias ou o meio de cultura suplementado com auxina, mantido na luz apresentando 100% de enraizamento. A aclimatização do Eucalyptus camaldulensis foi eficiente com taxa de sobrevivência de 76%. Portanto, foi possível desenvolver um método eficiente de micropropagação em biorreator para a produção de mudas Eucalyptus camaldulensis em larga escala.

ABSTRACT The plant micro-propagation in bioreactor systems is regarded as one way to reduce cost by automation and production scheduling. This research was carried out in order to obtain an efficient procedure for clone production of Eucalyptus camaldulensis on different types of bioreactor including continuous and temporary immersion bioreactor. To do so, the apical meristems (1 mm) and the apical meristems with adjacent tissue (2,5 mm) were used as initial explants. These tissues were cultured, for 60 days, in semisolid culture medium supplemented with 1 mg L-1 indole acetic acid (IAA) and 0.32 mg L-1 benzylaminopurine (BA). After 60 days, the meristems with adjacent tissue were transferred to a continuous immersion bioreactor and maintained in dark or light conditions. In order to verify the effect of the explant source on bioreactor multiplication, the explants subcultured from meristems multiplied in semisolid culture medium and the meristems multiplied in continuous immersion bioreactor were tested and maintained in dark conditions. After establishing this parameters, the multiplication experiments were carried out in continuous and temporary immersion and the multiplied explants were then rooted in MS medium supplemented with 0, 2, 4, 8 and 20 mg L-1 indole butyric acid (IBA) and kept in the dark or under controlled lighting conditions. After that, the rooting the plants were acclimatized in mist chamber. The meristem with adjacent tissue favored a greater number of buds/explants. The continuous immersion bioreactor in the dark provided higher shoots number and multiplication rate. The rooting was better on culture medium without auxin and kept in the dark for 15 days or the culture medium supplemented with auxin and maintained under light with 100% plantlet rooting. The Eucalyptus camaldulensis acclimatization was efficient, with high survival rate (76%). It was possible to establish the procedure for bioreactor micro-propagation of Eucalyptus camaldulensis large-scale clones.

This work studied a new protocol for organogenic calli induction and characterization of the morphology and ultrastructure of callogenesis in leaf explants of Passiflora gibertii N. E. Brown, a native passion fruit species from Brazil. Calli induction was performed in different growth conditions (light and dark), different MS medium salt concentrations (MS and MS half strength) and the presence or absence of coconut water. The leaf explants maintained in the dark were more responsive to bud formation. In order to reduce spending on in vitro culture, the most suitable induction medium for P. gibertii organogenesis could, therefore be the MS half strength salt concentration medium maintained in the dark. The addition of coconut water to the culture medium was essential for both calli induction and bud formation. The morphological and ultrastructural features of the organogenic calli were isodiametric cells, characterized by an organized cellular system, nucleus with prominent nucleoli, presence of starch grains and dense cytoplasm rich in endoplasmic reticulum. The scanning electron microscopy demonstrated that buds were present on these calli.

Frutos e amêndoas de dendezeiro, uma palmeira pertencente ao gênero Elaeis, são amplamente usados para a produção de óleos culinários ou para as indústrias farmacêutica e de cosméticos. Na última década esta palmeira oleífera também emergiu como fonte promissora para a produção comercial de biocombustíveis.Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito de diferentes meios de cultura, MS (MURASHIGUE; SKOOG) eY3 (EEUWENS)e de carboidratos na germinação in vitro de embriões zigóticos, o efeito dos reguladores de crescimentoGA3, ANA e BAP no desenvolvimento das plântulas in vitro e a taxa de sobrevivência dessas quando aclimatizadasdohíbrido Manicoré(Elaeis oleifera x E. guineensis). Embriões zigóticos foram inoculados em meio de cultivo MS e Y3 modificado, suplementados com diferentes concentrações de sacarose (30, 45 e 60 gL-1) ou sorbitol (36 gL-1) e, após 30 dias a taxa de germinação foi avaliada. Posteriormente, as plântulas foram transferidas para meio de cultivo Y3 modificado suplementado com diferentes concentrações de GA3 (3,5 e 7 mgL-1) ou sem, combinadas ou não com 1 mgL-1de ANA,5 mgL-1 de BAP. A maior porcentagem de embriões germinados (92%) foi obtida em meio de cultivo MS suplementado com 36 gL-1 de sorbitol. Os meios de cultivo suplementados com reguladores de crescimento GA3,, ANA e BAP promoveram maior comprimento da parte aéreaque os meios sem reguladores. As plântulas com raiz apresentaram a maior porcentagem de sobrevivência (85%) durante a aclimatização.

Fruits and almond from the dendezeiro, oil palmbelonging to the Elaeis genus,are widely used for the production of cookingoils or for the pharmaceutical and cosmetic industries.In the last decade, this oil palm also emerged as a promising source for commercialbiofuel production. This study evaluated the effect of different culture media, MS (MURASHIGUE AND SKOOG) and Y3 (EEUWENS)and carbohydrates duringin vitro germination of zygotic embryos, the effect of growth regulators GA3, NAA and BA Ponin vitro seedling development, and the survival rate of acclimatized seedlingsof Manicoré hybrid (Elaeis oleifera x E. guineensis). Zygotic embryos were inoculated on MS and modified Y3 media, supplemented with different sucrose concentrations (30, 45, and 60 gL-1) or sorbitol (36 gL-1), and the germination rate was evaluated after 30 days. Subsequently, seedlings were transferred to modified Y3 culture medium supplemented with differentGA3 concentrations (3.5 and 7 mgL-1) or without it, combined or not with 1 mgL-1 of NAA, 5 mgL-1 of BAP.The highest germinationpercentage of germinated embryos (92%) was observed in MS medium supplemented with 36 gL-1 sorbitol. Culture media supplemented with growth regulatorsGA3, NAA and BAP promoted greater shoot lengththan control media. Rooted seedlings showed high survival percentage (85%) during acclimatization.

O Eucalyptus destaca-se no cenário silvicultural mundial devido à sua adaptabilidade, crescimento rápido e produção de fibra de baixo custo e com alta qualidade. O melhoramento convencional do gênero é dificultado, principlamente, pelo seu longo ciclo de vida, tornando a transformação genética importante ferramenta para esse propósito. Esse processo requer o desenvolvimento de protocolo eficiente de progagação in vitro para indução, regeneração e seleção que permita a obtenção de plantas transgênicas a partir de grupos de células transformadas. Os objetivos deste trabalho foram avalair a formação de calos e otimizar o protocolo de transformação genética de folhas e calos através da infecção por A. tumefaciens. Para a formação de calos foram avaliados dois meios de cultura: meio de cultura MS supplementado com auxina e citocinina (M1) e meio de cultura MS com concentração de nitrogênio reduzida e suplementado com auxinas, citocininas e água de coco (M2). Para estabelecer o protocolo de transformação genética de E. camaldulensis, as folhas foram expostas à técnica de agrobiobalística, utilizando-se o bombardeador com micropartículas para realizar ferimentos nos tecidos; e A. tumefasciens EHA 105 contendo o vetor pCambia 3301 (35S::GUS::NOS) para a transferência do gene, enquanto para a transformação genética dos calos estes foram somente infectados com A. tumefasciens. Em ambos os experimentos foi avaliada a influência de diferentes períodos de infecção. O meio de cultura M2 promoveu os melhores valores de volume, massa seca e massa fresca. A transformação genética de folhas através da técnica de agrobiobalística foi efetiva, sendo possível observar a expressão transiente do gene gus, mas não houve diferenças significativas entre os períodos de infecção (4, 6 e 8 min). Os calos infectados por 15 e 30 min com A. tumefasciens também apresentaram expressão transiente do gene gus quando foram tranferidos para meio de cultura de regeneração e seleção e apresentaram formação de brotos.

Eucalyptus stands in the setting of worldwide forestry due to its adaptability, rapid growth, production of high-quality and low cost of wood pulp fibers. The eucalyptus convetional breeding is impaired mainlly by the long life cycle making the genetic transformation systems an important tool for this purpose. However, this system requires in vitro eficient protocols for plant induction, regeneration and seletion, that allow to obtain transgenic plants from the transformed cell groups. The aim of this work was to evaluate the callus formation and to optimize the leaves and callus genetic transformation protocol by using the Agrobacterium tumefaciens system. Concerning callus formation, two different culture media were evaluated: MS medium supplemented with auxin, cytokinin (M1) and the MS medium with reduced nitrogen concentration and supplemented with auxin, cytokinin coconut water (M2). To establish the leave genetic transformation, those were exposed to agrobiolistics technique (gene gun), to tissue injury, and A. tumesfasciens EHA 105 contening the vetor pCambia 3301 (35S::GUS::NOS), for gene transference and to establish the callus transformation thoses were exposed only to A. tumefasciens. For both experiments, the influence of different infection periods was evaluated. The M2 medium provided the best values for callus sizea and fresh and dry weight. The leaves genetic transformation using the agrobiolistics technique was effective, the gus gene transient expression could be observed. No significant differences were obtained in the infection periods (4, 6 and 8 minutes). The callus genetic transformation with A. tumefaciens also promotend the gus gene transient expression on the callus co-cultiveted for 15 e 30 minutes. The transformed callus was transfered to a regeneration and selection medium and transformed plants were obtained.

The objective of this work was to elucidate the growth curve of Eucalyptus camaldulensis Dehn. calli analyzing their anatomical modifications. A sigmoid aspect of the growth curve of the calli fresh matter was observed, with five different phases (lag, exponential, linear, deceleration and decline). In the lag phase, the highest growth percentage 87%, was observed, which reduced during the evaluation period to 17% in the linear phase. As for the anatomical analyses, cellular multiplications was observed during the lag and exponential phases and increase in cell size during the linear phase, promoting the calli volume growth and the establishment of the globular conformation.

Este trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar morfologicamente e ultra-estuturalmente calos (scalp method) de bananeira. Genótipos de bananeira, cv. Prata anã, cultivadas in vitro, foram utilizados para indução de meristemas na base das folhas e formação de estruturas conhecidas como scalp, que foram transferidas para meio ZZs. Os calos obtidos foram caracterizados morfológica e ultra-estruturalmente. Para as análises ultra-estruturais, foram coletadas, fixadas em Karnovsky e preparadas cinco amostras, que foram analisadas em microscópio eletrônico de varredura e de transmissão. Foi verificado formação de 3 tipos de calos (Tipo 1- calo transparente aquoso; Tipo 2- calo com glomérulos amarelos menores; Tipo 3- calo com glomérulos amarelos maiores). A análise por MEV mostrou que os calos Tipo1 apresentaram células alongadas; os calos Tipo 2 e Tipo 3 apresentaram células com formato isodiamétrico que condizem com características de calos embriogênicos. A análise por MET mostrou que os calos Tipo1 apresentaram parede delgada, grande quantidade de pequenos vacúolos e citoplasma disperso. Os calos Tipo 2 apresentaram citoplasma denso, vacúolos grandes e presença de mitocôndrias. Os calos Tipo 3 apresentaram parede espessa e espaços intercelulares. Assim, os calos Tipo 2 evidenciam características de calos embriogênicos.

This work was carried out to characterise morphologically and ultrastructurally the banana callus, obtained from the scalp method. Genotypes of banana, cv. Prata anã, cultivated in vitro were used to induce meristems at the leaf base; subsequently, structures known as scalps were formed. For ultrastructural analysis, five samples of callus were collected, fixed in Karnovsky solution and analysed by scanning electron microscope (SEM) and transmission electron microscope (TEM). The formation of three types of callus was observed: Type 1 - transparent watery callus, Type 2 - yellow callus with small clusters, Type 3 - yellow callus with large clusters. SEM analysis showed that Type 1 callus cells were elongated and that Type 2 and Type 3 callus cells were isodiametric, which is a characteristic of embryogenic cells. The TEM analysis showed that Type 1 callus cells had thin walls, a large number of small vacuoles and dispersed cytoplasm. The Type 2 callus cells showed dense cytoplasm, large vacuoles and a large amount of mitochondria. The Type 3 callus cells had thick and intercellular spaces. Thus, the Type 2 callus cells had characteristics consistent with embryogenic callus cells.

A compreensão da organogênese e embriogênese de plantas, nos estágios iniciais de desenvolvimento das células, requer a observação das mudanças subcelulares. No entanto, a caracterização citológica durante o desenvolvimento desses estágios não tem sido realizada com frequência na cultura de tecidos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar as diferenças ultraestruturais relacionadas a calogênese de anteras, ovários, folha e segmentos nodais de Inga vera Willd. subsp. Affinis (DC.) T.D. Penn. Para tanto, botões florais, segmentos nodais e folhas foram desinfestados e inoculados em tubos de ensaio contendo meio MS com 3% de sacarose e 4,5 µM de 2,4-D, exceto na calogênese de folhas, em que foram utilizados 9 µM dessa auxina, e na calogênese de anteras e ovários, cujo meio de cultura foi acrescido de 0,25% de carvão ativado e 90 µM de PVP. Após 45 dias em meio de cultura, os calos de anteras, ovários, folhas e segmentos nodais foram fixados em Karnovisky e preparados para a visualização em microscopia eletrônica de varredura e microscopia eletrônica de transmissão. Assim, foram observadas diferenças ultraestruturais entre as células dos calos provenientes de anteras, ovários, segmentos e folhas. Os calos de anteras, folhas e segmentos nodais não apresentaram evidências de formação de embriões somáticos, apesar de suas células possuírem algumas características embriogênicas. No entanto, os calos de ovários parecem ser a fonte de explante mais responsiva à embriogênese, mostrando indícios de formação de embriões.

Subcellular changes are relevant to understand plant organogenesis and embryogenesis in the early stages of cell development. The cytology during cell development in tissue culture is however still poorly characterized. This study aimed to characterize the ultrastructural differences related to callogenesis of anthers, ovaries, leaf and nodal segments of Inga vera Willd. subsp. Affinis (DC.) T.D. Penn. Flower buds, nodal segments and leaves were disinfected and inoculated in test tubes containing MS medium with 3% sucrose and 4.5µM 2.4-D, except for leaf callogenesis, where 9µM of this auxin was used, and for the callogenesis of anthers and ovaries, where the culture medium was enriched with 0.25% activated charcoal and 90µM PVP. After 45 days in culture medium, the anther, ovary, leaf and nodal segment calli were fixed in Karnovisky and prepared for visualization by scanning and transmission electron microscopy. Ultrastructural differences were observed among the callus cells of anthers, ovaries, segments and leaves. There was no evidence of somatic embryo formation in the anther, leaf and nodal segment calli, in spite of some embryogenic characteristics in the cells. The ovary calli, with indications of embryo formation, seem to be the most responsive explant source for embryogenesis.

A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) destaca-se por possuir um grande potencial como planta frutífera e produtora de borracha. As dificuldades encontradas no seu processo de propagação por meio de sementes, devido, principalmente, à baixa taxa de germinação e à recalcitrância, valorizam a busca por soluções alternativas para a produção de mudas dessa espécie, de maneira rápida e eficiente. Objetivou-se, neste trabalho, realizar o estudo da germinação de sementes de mangabeira em condições in vitro, tendo como precedente a obtenção de explantes, para posterior utilização no cultivo in vitro. Neste estudo foram avaliados os efeitos de diferentes meios de cultura, concentrações de sacarose e GA3 e de três níveis de pH na germinação da mangabeira. Frutos maduros foram coletados, passaram por processo de beneficiamento e tiveram suas sementes retiradas e utilizadas como explantes. Maior porcentagem de germinação de sementes de mangabeira in vitro foi obtida com a utilização dos meios de cultura WPM e MS/2, suplementados com 15,0 g L-1 de sacarose, 0,2 mg L-1 de GA3 e com pH corrigido para 5,8.

The Hancornia speciosa Gomes species presents potential for fruit and rubber production. Propagation is difficult primarily due, to a reduced seed germination and occurrence of recalcitrant seeds that stimulate the search of rapid and efficient propagation alternatives. In this context, the aim of this work was to study in vitro seed germination conditions in order to produce explants to be used on in vitro culture. The effect of different culture media, sucrose and GA3 concentrations and three pH levels were evaluated. Seeds were extracted from mature fruits after being harvested and processed. Higher in vitro germination was obtained using WPM and MS/2 media supplemented with 15.0 g L-1, 0.2 mg L-1 GA3 and pH adjusted to 5.8.

O Inga vera Will subsp. affinis (DC). T.D. Penn. é uma espécie frutífera nativa do Cerrado, importante na recuperação de matas ciliares degradadas. Entretanto, apresenta sua propagação dificultada pelo fato de suas sementes serem recalcitrantes, ou seja, não tolerarem a perda de água. O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos da germinação ex vitro e in vitro de ingazeiro. Para tanto, foram avaliados os efeitos de diferentes substratos: areia, Plantmax® e Areia+ Plantmax®; diferentes concentrações de sais: WPM, WPM/2, MS e MS/2, e diferentes concentrações de GA3 (0, 5, 10, 17 e 20 µM) no meio de cultura. Observou-se que, na germinação ex vitro, o substrato Plantmax® proporcionou maior porcentagem de germinação (82%). Com relação à germinação in vitro, a maior percentagem de germinação foi obtida utilizando-se meio de cultura WPM/2 (96%). A adição de GA3 no meio de cultura não foi estatisticamente significativa, no entanto, a concentração de 20 µM de GA3 proporcionou um aumento na germinabilidade de sementes de ingazeiro.

The Inga vera Will subsp. affinis (DC). T.D. Penn. is fruit native specie from cerrado, commonly for recovering devastated areas. However, its propagation is complicated due to the fact that the seeds are recalcitrant and does not support water loss. The objective of this work was to study Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T.D. Penn. ex vitro and in vitro germination aspects. For this purpose, different substrates: sand, Plantmax® and sand+ Plantmax®; different salt concentrations: WPM, WPM/2, MS and MS/2, and different GA3 concentrations (0, 5, 10, 17 and 20 µM) were evaluated. The results showed that, in the ex vitro germination, the use of Plantmax® provided the highest germination percentage (82%). Regarding the in vitro germination, highest percentage was observed using WPM/2 (96%). The addition of GA3 was not statistically significant although the concentration of 20 µM promoted an increase in the germination of Inga vera seeds.